「NextBit」麦吉尔大学最新研究:GSH添加剂能够大幅提高试管婴儿技术成功率

最近麦吉尔大学的研究者们发表了最新的关于试管婴儿技术的研究进展。在现代试管婴儿技术里,卵母细胞冷冻保存是至关重要的。虽然卵母细胞在细胞分裂中期II的低温保存已被广泛使用,但未成熟的卵母细胞(GV-卵母细胞)需要一定的特殊保存条件,然而体外成熟(IVM)的要求导致来自GV-卵母细胞的胚胎发育的成功率仍然很低。该研究分析了透明化和变暖期间谷胱甘肽(GSH)补充剂对小鼠GV-卵母细胞发育能力的影响。
「NextBit」麦吉尔大学最新研究:GSH添加剂能够大幅提高试管婴儿技术成功率

目前配子(精子和卵母细胞)和胚胎的冷冻保存已经成为不可分割的一部分辅助生殖技术(ART)。特别是精液冷冻保存已经广泛的、成功的用于人类以及各种哺乳动物物种,胚胎冷冻保存也成为临床ART的常规做法,并且已经诞下许多健康的婴儿。

哺乳动物物种的冷冻保存GV-卵母细胞已经被进行了大量的研究,然而根据报道,人和小鼠的胚泡发育成功率仍然很低。一个主要的障碍是低温保存的GV-卵母细胞在受精前在体外成熟(IVM)的要求。 研究者们之前用左旋肉碱(LC)作为添加剂培养小鼠GV-卵母细胞的透明化,通过升温提高了小鼠品的IVF成功率。
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卵母细胞在透明化、变暖时受到氧化,容易导致线粒体和DNA损伤,随后影响胚胎发育。谷胱甘肽还原形式(GSH,γ-谷氨酰半胱氨酰甘氨酸)是一种有效的内源性抗氧化剂,可保护细胞不被氧化。此外卵母细胞的GSH浓度增加与排卵息息相关。因此,研究者们通过一系列动物实验,验证了GSH添加剂在透明化和变暖期间对小鼠GV卵母细胞发育的影响。

研究者们选用了加拿大动物中心的无病动物,经过标准化的培养,使C57BL/6J(B6)雌鼠分别与DBA和B6雄鼠交配以产生B6-DBA杂交子一代(F1)和B6后代。随后从F1和B6后代体内获取GV-卵母细胞并进行透明化和加热培养。实验组的培养基被补充了0-4.0mM的GSH,随后体外成熟的卵母细胞在体外受精并在KSOMaa中培养4天。解剖后对囊胚处于形态学上的发育阶段进行评估,并进行多次比较测试。

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最后,研究者们在每个实验组中检测了至少40个卵母细胞,每个实验重复3次以上。数据以平均值±SEM表示,通过单因素变量分析方差,然后进行了多次比较测试。结果所有数据P <0.05,结果具有统计学意义。

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该实验数据表明:培养基中补充GSH对第一次裂解或胚泡发育没有抑制作用;透明化及加热时,1mM GSH添加剂能够增加囊胚发育成功率。因此,该实验证实了GV-卵母细胞透明化和变暖期间的GSH添加剂能够保护卵母细胞冻结造成的发育能力丧失的问题。

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